細胞培養(yǎng)（cell culture）技術是指選用各種細胞的生存條件對活細胞進行培養(yǎng)和研究的技術，是廣泛應用于生命科學領域的重要技術。
復蘇
1.把凍存管從液氮中取出來，立即投入37℃水浴鍋中，輕微搖動。液體都融化后(大概1-1.5分鐘)，拿出來噴點酒精放到超凈工作臺里。
2.把上述細胞懸液吸到裝10ml培養(yǎng)基的15ml的離心管中(用培養(yǎng)基把凍存管洗一遍，把粘在壁上的細胞都洗下來)，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
3.把上清液倒掉，加1ml培養(yǎng)基把細胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養(yǎng)基的10cm培養(yǎng)皿中前后左右輕輕搖動，使培養(yǎng)皿中的細胞均勻分布。
4.標好細胞種類和日期、培養(yǎng)人名字等，放到CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，細胞貼壁后換培養(yǎng)基。
5.3天換一次培養(yǎng)基。
傳代
1.培養(yǎng)皿中的細胞覆蓋率達到80%-90%時要傳代。
2.把原有培養(yǎng)基吸掉。
3.加適當?shù)囊鹊鞍酌?能覆蓋細胞就行)，消化1-2分鐘。
4.細胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。
5.用移液槍吹打細胞，把細胞都懸浮起來。
6.把細胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
7.倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細胞都吹起來。
8.根據(jù)細胞種類把細胞傳到幾個培養(yǎng)皿中。一般，癌細胞分5個，正常細胞傳3個。繼續(xù)培養(yǎng)。
凍存
把細胞消化下來并離心(同上)。用配好的凍存液把細胞懸浮起來，分裝到滅菌的凍存管中，靜止幾分鐘，寫明細胞種類，凍存日期。4℃30min，-20℃30min，-80℃過夜，然后放到液氮灌中保存。
凍存液的配制：70%的完全培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加，邊滴邊搖。

主要特征:

●二氧化碳培養(yǎng)箱采用流線型圓弧設計，外殼采用冷軋鋼板制造，表面靜電噴塑；內(nèi)膽均為優(yōu)質(zhì)不銹鋼材料制成，半圓形四角設計使清潔更方便。

●微電腦溫度控制器，溫度波動小，箱內(nèi)裝有紫外線殺菌燈可定期對箱內(nèi)進行紫外線消毒，從而更有防止細胞培養(yǎng)期間污染。

●二氧化碳培養(yǎng)箱采用門溫控可有效防止箱內(nèi)玻璃門結(jié)露現(xiàn)象。

●水套式配有微生物過濾器位于進氣口，提供100%過濾氣體。

●配有二氧化碳培養(yǎng)箱減壓閥。（選配）

●二氧化碳培養(yǎng)箱設有獨立限溫報警系統(tǒng)，超過限制溫度即自動中斷，保證實驗安全運行，不發(fā)生意外。（選配）

技術參數(shù):

 培養(yǎng)箱使用注意事項  

1、從培養(yǎng)箱取放物品前，用酒精清潔雙手（或手套），盡量縮短開門時間和減少開門次數(shù)。（注：培養(yǎng)箱中的空氣是經(jīng)過過濾的潔凈空氣。長時間敞開或頻繁開關培養(yǎng)箱，容易造成污染。） 

2、從培養(yǎng)箱拿取細胞時輕拿輕放，動作迅速，隨手關緊培養(yǎng)箱門。未經(jīng)允許，禁止翻看、移動他人細胞或樣品，如有特殊需要的，請聯(lián)系實驗室負責人協(xié)調(diào)。 

3、培養(yǎng)瓶皿放入培養(yǎng)箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精揮發(fā)后再放入，以免培養(yǎng)箱內(nèi)滯留過多乙醇蒸氣。  

4、培養(yǎng)箱內(nèi)細胞培養(yǎng)的放置需整潔有序，方便查找，同時應盡量提高培養(yǎng)箱的使用效率，負責人可視實驗情況啟用或停止空培養(yǎng)箱的使用，節(jié)約資源。 

5、普通培養(yǎng)中的細胞，若非實驗特殊需要，每瓶/板細胞每天只需要觀察生長狀態(tài)一次，2人以上共用的細胞，可約好時間一起觀察。（注：頻繁將細胞拿出觀察，容易給培養(yǎng)箱造成污染，同時也會影響細胞生長條件的恒定。）   

6、實驗人員應經(jīng)常注意檢查培養(yǎng)箱溫度、CO2氣體量是否相符設定值。密切注意培養(yǎng)箱內(nèi)的增濕盤，定期更換無菌水并進行消毒。密切注意培養(yǎng)箱內(nèi)情況，如出現(xiàn)霉變、菌斑、支原體和衣原體感染或其他明顯染菌跡象，應立即通知管理員及其它使用者。